ການປະເມີນທາດໄອໂອດິນ ແລະ ອາເວີເມັກຕິນ ໃນຖານະທີ່ເປັນຕົວກະຕຸ້ນພະຍາດເນມາໂທດຂອງຕົ້ນສົນ

ໜອນຜີເສື້ອສົນແມ່ນປາຣາໄຊທ໌ອົບພະຍົບທີ່ຮູ້ກັນວ່າເປັນສາເຫດຂອງການສູນເສຍທາງເສດຖະກິດທີ່ຮ້າຍແຮງໃນລະບົບນິເວດປ່າສົນ. ການສຶກສາໃນປະຈຸບັນທົບທວນກິດຈະກຳການຂ້າໜອນຜີເສື້ອຂອງອິນໂດລທີ່ມີຮາໂລເຈນຕໍ່ກັບໜອນຜີເສື້ອສົນ ແລະ ກົນໄກການອອກລິດຂອງມັນ. ກິດຈະກຳການຂ້າໜອນຜີເສື້ອຂອງ 5-iodoindole ແລະ avermectin (ກຸ່ມຄວບຄຸມໃນທາງບວກ) ຕໍ່ກັບໜອນຜີເສື້ອສົນແມ່ນຄ້າຍຄືກັນ ແລະ ສູງໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ຳ (10 μg/mL). 5-iodoindole ຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສາມາດໃນການສືບພັນ, ກິດຈະກຳການສືບພັນ, ການຕາຍຂອງຕົວອ່ອນ ແລະ ຕົວອ່ອນ, ແລະ ພຶດຕິກຳການເຄື່ອນທີ່. ປະຕິກິລິຍາທາງໂມເລກຸນຂອງລີກັນກັບຕົວຮັບຊ່ອງທາງຄລໍໄຣດ໌ທີ່ມີກລູຕາເມດສະເພາະຂອງສັດທີ່ບໍ່ມີກະດູກສັນຫຼັງສະໜັບສະໜູນແນວຄວາມຄິດທີ່ວ່າ 5-iodoindole, ເຊັ່ນດຽວກັບ avermectin, ຜູກມັດຢ່າງແໜ້ນໜາກັບບ່ອນເຮັດວຽກຂອງຕົວຮັບ. 5-Iodoindole ຍັງກະຕຸ້ນການຜິດຮູບແບບຕ່າງໆໃນໜອນຜີເສື້ອ, ລວມທັງການລົ້ມລົງ/ຫົດຕົວຂອງອະໄວຍະວະທີ່ຜິດປົກກະຕິ ແລະ ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງ vacuolization. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ vacuoles ອາດມີບົດບາດໃນການຕາຍທີ່ເກີດຈາກ methylation ຂອງໜອນຜີເສື້ອ. ສິ່ງສຳຄັນ, 5-iodoindole ບໍ່ເປັນພິດຕໍ່ພືດທັງສອງຊະນິດ (ກະລໍ່າປີ ແລະ ຜັກກາດຂາວ). ດັ່ງນັ້ນ, ການສຶກສານີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການໃຊ້ iodoindole ພາຍໃຕ້ສະພາບແວດລ້ອມສາມາດຄວບຄຸມການບາດເຈັບຂອງຕົ້ນສົນໄດ້.
ໜອນຜີເສື້ອໄມ້ສົນ (Bursaphelenchus xylophilus) ເປັນຂອງໜອນຜີເສື້ອໄມ້ສົນ (PWN), ເຊິ່ງເປັນໜອນຜີເສື້ອທີ່ອົບພະຍົບເຊິ່ງເປັນທີ່ຮູ້ຈັກວ່າເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມເສຍຫາຍທາງນິເວດວິທະຍາທີ່ຮ້າຍແຮງຕໍ່ລະບົບນິເວດປ່າສົນ1. ພະຍາດເຫື່ອຂອງຕົ້ນສົນ (PWD) ທີ່ເກີດຈາກໜອນຜີເສື້ອໄມ້ສົນກຳລັງກາຍເປັນບັນຫາຮ້າຍແຮງໃນຫຼາຍທະວີບ, ລວມທັງອາຊີ ແລະ ເອີຣົບ, ແລະ ໃນອາເມລິກາເໜືອ, ໜອນຜີເສື້ອທຳລາຍຊະນິດສົນທີ່ນຳເຂົ້າມາ1,2. ການຫຼຸດລົງຂອງຕົ້ນສົນເປັນບັນຫາເສດຖະກິດທີ່ສຳຄັນ, ແລະ ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການແຜ່ກະຈາຍທົ່ວໂລກຂອງມັນແມ່ນໜ້າເປັນຫ່ວງ3. ຊະນິດສົນຕໍ່ໄປນີ້ຖືກໂຈມຕີໂດຍໜອນຜີເສື້ອຫຼາຍທີ່ສຸດ: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, ແລະ Pinus radiata4. ໜອນຜີເສື້ອສົນເປັນພະຍາດທີ່ຮ້າຍແຮງທີ່ສາມາດຂ້າຕົ້ນສົນພາຍໃນອາທິດ ຫຼື ເດືອນຫຼັງຈາກຕິດເຊື້ອ. ນອກຈາກນັ້ນ, ການລະບາດຂອງໜອນຜີເສື້ອສົນແມ່ນພົບເລື້ອຍໃນຫຼາຍລະບົບນິເວດ, ສະນັ້ນຈຶ່ງມີການສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນເປັນລະບົບຕ່ອງໂສ້ການຕິດເຊື້ອທີ່ຍືນຍົງ1.
ແມງກະເບື້ອ Bursaphelenchus xylophilus ເປັນແມງກະເບື້ອທີ່ເປັນປາສິດຂອງພືດທີ່ຖືກກັກກັນ ເຊິ່ງເປັນຂອງຄອບຄົວ Aphelenchoidea ແລະ clade 102.5. ແມງກະເບື້ອກິນເຊື້ອເຫັດ ແລະ ສືບພັນໃນເນື້ອເຍື່ອໄມ້ຂອງຕົ້ນສົນ, ພັດທະນາເປັນສີ່ໄລຍະຂອງຕົວອ່ອນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຄື: L1, L2, L3, L4 ແລະ ຕົວເຕັມໄວ1,6. ພາຍໃຕ້ສະພາບການຂາດແຄນອາຫານ, ແມງກະເບື້ອສົນຈະຜ່ານເຂົ້າສູ່ໄລຍະຂອງຕົວອ່ອນພິເສດ - dauer, ເຊິ່ງເປັນປາສິດພາຫະຂອງມັນ - ແມງກະເບື້ອເປືອກສົນ (Monochamus alternatus) ແລະ ຖືກໂອນໄປຫາຕົ້ນສົນທີ່ມີສຸຂະພາບດີ. ໃນເຈົ້າພາບທີ່ມີສຸຂະພາບດີ, ແມງກະເບື້ອຈະເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານເນື້ອເຍື່ອພືດຢ່າງໄວວາ ແລະ ກິນຈຸລັງເນື້ອເຍື່ອ, ເຊິ່ງນຳໄປສູ່ປະຕິກິລິຍາແພ້ຫຼາຍຢ່າງ, ການຫ່ຽວແຫ້ງຂອງຕົ້ນສົນ ແລະ ການຕາຍພາຍໃນໜຶ່ງປີຫຼັງຈາກການຕິດເຊື້ອ1,7,8.
ການຄວບຄຸມທາງຊີວະພາບຂອງໄສ້ເດືອນສົນເປັນສິ່ງທ້າທາຍມາດົນແລ້ວ, ໂດຍມີມາດຕະການກັກກັນມາຕັ້ງແຕ່ສະຕະວັດທີ 20. ຍຸດທະສາດໃນປະຈຸບັນສຳລັບການຄວບຄຸມໄສ້ເດືອນສົນສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບການປິ່ນປົວດ້ວຍສານເຄມີ, ລວມທັງການຮົມຄວັນໄມ້ ແລະ ການຝັງຢາຂ້າໜອນເຂົ້າໄປໃນລຳຕົ້ນຂອງຕົ້ນໄມ້. ຢາຂ້າໜອນທີ່ນິຍົມໃຊ້ຫຼາຍທີ່ສຸດແມ່ນ avermectin ແລະ avermectin benzoate, ເຊິ່ງເປັນຂອງຄອບຄົວ avermectin. ສານເຄມີທີ່ມີລາຄາແພງເຫຼົ່ານີ້ມີປະສິດທິພາບສູງຕໍ່ກັບຊະນິດໄສ້ເດືອນຫຼາຍຊະນິດ ແລະ ຖືວ່າປອດໄພຕໍ່ສິ່ງແວດລ້ອມ9. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ການໃຊ້ຢາຂ້າໜອນເຫຼົ່ານີ້ຊ້ຳແລ້ວຊ້ຳອີກຄາດວ່າຈະສ້າງຄວາມກົດດັນໃນການຄັດເລືອກທີ່ເກືອບແນ່ນອນວ່າຈະນຳໄປສູ່ການເກີດຂຶ້ນຂອງໄສ້ເດືອນສົນທີ່ຕ້ານທານ, ດັ່ງທີ່ໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນສຳລັບສັດຕູພືດຫຼາຍຊະນິດ, ເຊັ່ນ Leptinotarsa ​​​​decemlineata, Plutella xylostella ແລະ ໄສ້ເດືອນ Trichostrongylus colubriformis ແລະ Ostertagia circumcincta, ເຊິ່ງຄ່ອຍໆພັດທະນາຄວາມຕ້ານທານຕໍ່ avermectins10,11,12. ດັ່ງນັ້ນ, ຮູບແບບການຕ້ານທານຕ້ອງໄດ້ຮັບການສຶກສາເປັນປະຈຳ ແລະ ກວດກາຢາຂ້າໜອນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງເພື່ອຊອກຫາມາດຕະການທາງເລືອກ, ມີປະສິດທິພາບດ້ານຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ ແລະ ເປັນມິດກັບສິ່ງແວດລ້ອມເພື່ອຄວບຄຸມ PVD. ໃນຊຸມປີມໍ່ໆມານີ້, ຜູ້ຂຽນຈຳນວນໜຶ່ງໄດ້ສະເໜີໃຫ້ໃຊ້ສານສະກັດຈາກພືດ, ນ້ຳມັນຫອມລະເຫີຍ ແລະ ສານລະເຫີຍທີ່ລະເຫີຍໄດ້ເປັນຕົວແທນຄວບຄຸມໜອນຜີເສື້ອ13,14,15,16.
ບໍ່ດົນມານີ້ພວກເຮົາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳການຂ້າເຊື້ອເນມາຕິກຂອງອິນໂດລ, ເຊິ່ງເປັນໂມເລກຸນສັນຍານລະຫວ່າງຈຸລັງ ແລະ ລະຫວ່າງອານາຈັກ, ໃນ Caenorhabditis elegans 17. ອິນໂດລເປັນສັນຍານພາຍໃນຈຸລັງທີ່ແຜ່ຂະຫຍາຍຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນລະບົບນິເວດວິທະຍາຂອງຈຸລິນຊີ, ຄວບຄຸມໜ້າທີ່ຫຼາຍຢ່າງທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ສະລີລະວິທະຍາຂອງຈຸລິນຊີ, ການສ້າງສະປໍ, ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງພລາສມິດ, ການຕ້ານທານຢາ, ການສ້າງຟິມຊີວະພາບ, ແລະ ຄວາມຮຸນແຮງ 18, 19. ກິດຈະກຳຂອງອິນໂດລ ແລະ ອະນຸພັນຂອງມັນຕໍ່ກັບເນມາໂຕດທີ່ເປັນພະຍາດອື່ນໆຍັງບໍ່ທັນໄດ້ຮັບການສຶກສາ. ໃນການສຶກສານີ້, ພວກເຮົາໄດ້ສືບສວນກິດຈະກຳການຂ້າເຊື້ອເນມາຕິກຂອງອິນໂດລ 34 ໂຕຕໍ່ກັບເນມາໂຕດສົນ ແລະ ໄດ້ອະທິບາຍກົນໄກການອອກລິດຂອງ 5-iodoindole ທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງສຸດໂດຍໃຊ້ກ້ອງຈຸລະທັດ, ການຖ່າຍຮູບແບບ time-lapse, ແລະ ການທົດລອງການເຊື່ອມຕໍ່ໂມເລກຸນ, ແລະ ໄດ້ປະເມີນຜົນກະທົບທີ່ເປັນພິດຂອງມັນຕໍ່ພືດໂດຍໃຊ້ການທົດສອບການແຕກງອກຂອງເມັດພັນ.
ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງ (>1.0 mM) ຂອງອິນໂດລໄດ້ຖືກລາຍງານວ່າມີຜົນກະທົບຕໍ່ການຂ້າເຊື້ອເນມາໂຕດ17. ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວ B. xylophilus (ໄລຍະຊີວິດປະສົມ) ດ້ວຍອິນໂດລ ຫຼື ອະນຸພັນອິນໂດລ 33 ຊະນິດທີ່ແຕກຕ່າງກັນທີ່ 1 mM, ອັດຕາການຕາຍຂອງ B. xylophilus ໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍການນັບເນມາໂຕດທີ່ມີຊີວິດ ແລະ ຕາຍແລ້ວໃນກຸ່ມຄວບຄຸມ ແລະ ກຸ່ມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ. ອິນໂດລຫ້າຊະນິດສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳການຂ້າເຊື້ອເນມາໂຕດທີ່ສຳຄັນ; ການຢູ່ລອດຂອງກຸ່ມຄວບຄຸມທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວແມ່ນ 95 ± 7% ຫຼັງຈາກ 24 ຊົ່ວໂມງ. ໃນຈຳນວນອິນໂດລ 34 ຊະນິດທີ່ທົດສອບ, 5-iodoindole ແລະ 4-fluoroindole ທີ່ 1 mM ເຮັດໃຫ້ເກີດການຕາຍ 100%, ໃນຂະນະທີ່ 5,6-difluoroindigo, methylindole-7-carboxylate, ແລະ 7-iodoindole ເຮັດໃຫ້ເກີດການຕາຍປະມານ 50% (ຕາຕະລາງທີ 1).
ຜົນກະທົບຂອງ 5-iodoindole ຕໍ່ການສ້າງ vacuole ແລະ metabolism ຂອງ nematode ໄມ້ສົນ. (A) ຜົນກະທົບຂອງ avermectin ແລະ 5-iodoindole ຕໍ່ nematode ເພດຜູ້ຜູ້ໃຫຍ່, (B) ໄຂ່ nematode ໃນໄລຍະ L1 ແລະ (C) metabolism ຂອງ B. xylophilus, (i) vacuoles ບໍ່ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນເວລາ 0 ຊົ່ວໂມງ, ການປິ່ນປົວໄດ້ຜົນໃນ (ii) vacuoles, (iii) ການສະສົມຂອງ vacuoles ຫຼາຍອັນ, (iv) ການໃຄ່ບວມຂອງ vacuoles, (v) ການລວມຕົວຂອງ vacuoles ແລະ (vi) ການສ້າງ vacuoles ຍັກ. ລູກສອນສີແດງຊີ້ບອກເຖິງການໃຄ່ບວມຂອງ vacuoles, ລູກສອນສີຟ້າຊີ້ບອກເຖິງການລວມຕົວຂອງ vacuoles ແລະລູກສອນສີດຳຊີ້ບອກເຖິງ vacuoles ຍັກ. ແຖບມາດຕາສ່ວນ = 50 μm.
ນອກຈາກນັ້ນ, ການສຶກສານີ້ຍັງໄດ້ອະທິບາຍເຖິງຂະບວນການຕາມລຳດັບຂອງການຕາຍທີ່ເກີດຈາກມີເທນໃນເນື້ອເຍື່ອເນມາໂຕດສົນ (ຮູບທີ 4C). ການຕາຍທີ່ເກີດຈາກມີເທນແມ່ນການຕາຍຂອງເຊວທີ່ບໍ່ແມ່ນການຕາຍແບບ apoptosis ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການສະສົມຂອງ vacuoles cytoplasmic ທີ່ໂດດເດັ່ນ27. ຂໍ້ບົກຜ່ອງທາງດ້ານຮູບຮ່າງທີ່ສັງເກດເຫັນໃນເນື້ອເຍື່ອເນມາໂຕດສົນເບິ່ງຄືວ່າມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງຢ່າງໃກ້ຊິດກັບກົນໄກການຕາຍທີ່ເກີດຈາກມີເທນ. ການກວດສອບດ້ວຍກ້ອງຈຸລະທັດໃນເວລາທີ່ແຕກຕ່າງກັນສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ vacuoles ຍັກໃຫຍ່ໄດ້ຖືກສ້າງຂຶ້ນຫຼັງຈາກ 20 ຊົ່ວໂມງຂອງການສຳຜັດກັບ 5-iodoindole (0.1 mM). vacuoles ກ້ອງຈຸລະທັດໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຫຼັງຈາກ 8 ຊົ່ວໂມງຂອງການປິ່ນປົວ, ແລະຈຳນວນຂອງມັນເພີ່ມຂຶ້ນຫຼັງຈາກ 12 ຊົ່ວໂມງ. vacuoles ຂະໜາດໃຫຍ່ຫຼາຍອັນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຫຼັງຈາກ 14 ຊົ່ວໂມງ. vacuoles ປະສົມຫຼາຍອັນສາມາດເຫັນໄດ້ຢ່າງຊັດເຈນຫຼັງຈາກ 12–16 ຊົ່ວໂມງຂອງການປິ່ນປົວ, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການປະສົມ vacuole ແມ່ນພື້ນຖານຂອງກົນໄກການຕາຍທີ່ເກີດຈາກມີເທນ. ຫຼັງຈາກ 20 ຊົ່ວໂມງ, vacuoles ຍັກໃຫຍ່ຫຼາຍອັນໄດ້ຖືກພົບເຫັນທົ່ວຕົວໜອນ. ການສັງເກດເຫຼົ່ານີ້ເປັນຕົວແທນຂອງບົດລາຍງານທຳອິດຂອງ metuosis ໃນ C. elegans.
ໃນແມ່ທ້ອງທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ 5-iodoindole, ການລວມຕົວຂອງ vacuole ແລະ ການແຕກຂອງ vacuole ກໍ່ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນເຊັ່ນກັນ (ຮູບທີ 5), ດັ່ງທີ່ເຫັນໄດ້ຈາກການງໍຂອງແມ່ທ້ອງ ແລະ ການປ່ອຍ vacuole ສູ່ສິ່ງແວດລ້ອມ. ການລົບກວນຂອງ vacuole ຍັງໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຢູ່ໃນເຍື່ອຫຸ້ມໄຂ່, ເຊິ່ງປົກກະຕິແລ້ວຈະຖືກຮັກສາໄວ້ຢ່າງຄົບຖ້ວນໂດຍ L2 ໃນລະຫວ່າງການຟັກ (ຮູບເສີມ S2). ການສັງເກດເຫຼົ່ານີ້ສະໜັບສະໜູນການມີສ່ວນຮ່ວມຂອງການສະສົມຂອງນ້ຳ ແລະ ຄວາມລົ້ມເຫຼວຂອງ osmoregulatory, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການບາດເຈັບຂອງຈຸລັງທີ່ສາມາດປີ້ນກັບຄືນໄດ້ (RCI), ໃນຂະບວນການສ້າງ vacuole ແລະ ການອຸດຕັນ (ຮູບທີ 5).
ໂດຍສົມມຸດຕິຖານບົດບາດຂອງທາດໄອໂອດິນໃນການສ້າງແວຄິວໂອລທີ່ສັງເກດເຫັນ, ພວກເຮົາໄດ້ສືບສວນກິດຈະກຳການຂ້າຕົວຕາຍຂອງໂຊດຽມໄອໂອໄດ (NaI) ແລະໂພແທດຊຽມໄອໂອໄດ (KI). ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ (0.1, 0.5 ຫຼື 1 mM), ພວກມັນບໍ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການຢູ່ລອດຂອງເນມາໂທດ ຫຼື ການສ້າງແວຄິວໂອລ (ຮູບເສີມ S5), ເຖິງແມ່ນວ່າ 1 mM KI ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການຂ້າຕົວຕາຍເລັກນ້ອຍ. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, 7-ໄອໂອໂດອິນໂດລ (1 ຫຼື 2 mM), ເຊັ່ນດຽວກັບ 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລ, ເຮັດໃຫ້ເກີດແວຄິວໂອລຫຼາຍອັນ ແລະ ການຜິດຮູບໂຄງສ້າງ (ຮູບເສີມ S6). ໄອໂອໂດອິນໂດລສອງອັນສະແດງໃຫ້ເຫັນລັກສະນະ phenotypic ທີ່ຄ້າຍຄືກັນໃນເນມາໂທດສົນ, ໃນຂະນະທີ່ NaI ແລະ KI ບໍ່ໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນ. ສິ່ງທີ່ໜ້າສົນໃຈແມ່ນອິນໂດລບໍ່ໄດ້ກະຕຸ້ນການສ້າງແວຄິວໂອລໃນ B. xylophilus ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ທົດສອບ (ບໍ່ໄດ້ສະແດງຂໍ້ມູນ). ດັ່ງນັ້ນ, ຜົນໄດ້ຮັບຢືນຢັນວ່າສະລັບສັບຊ້ອນອິນໂດລ-ໄອໂອດີນແມ່ນຮັບຜິດຊອບຕໍ່ການສ້າງແວຄິວໂອລ ແລະ ການເຜົາຜານອາຫານຂອງ B. xylophilus.
ໃນບັນດາອິນໂດລສ໌ທີ່ຖືກທົດສອບກິດຈະກຳການຂ້າຕົວຕາຍ, 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລ໌ມີດັດຊະນີການເລື່ອນສູງສຸດ -5.89 kcal/mol, ຕາມດ້ວຍ 7-ໄອໂອໂດອິນໂດລ໌ (-4.48 kcal/mol), 4-ຟລູໂອອິນໂດລ໌ (-4.33), ແລະ ອິນໂດລ໌ (-4.03) (ຮູບທີ 6). ພັນທະໄຮໂດຣເຈນກະດູກສັນຫຼັງທີ່ເຂັ້ມແຂງຂອງ 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລ໌ກັບລີວຊີນ 218 ເຮັດໃຫ້ການຜູກມັດຂອງມັນໝັ້ນຄົງ, ໃນຂະນະທີ່ອະນຸພັນອິນໂດລ໌ອື່ນໆທັງໝົດຜູກມັດກັບຊີຣີນ 260 ຜ່ານພັນທະໄຮໂດຣເຈນຕ່ອງໂສ້ຂ້າງ. ໃນບັນດາ iodoindoles ທີ່ຖືກຈຳລອງອື່ນໆ, 2-iodoindole ມີຄ່າການຜູກມັດ -5.248 kcal/mol, ເຊິ່ງເປັນຍ້ອນພັນທະໄຮໂດຣເຈນຫຼັກຂອງມັນກັບ leucine 218. ການຜູກມັດອື່ນໆທີ່ຮູ້ຈັກລວມມີ 3-iodoindole (-4.3 kcal/mol), 4-iodoindole (-4.0 kcal/mol), ແລະ 6-fluoroindole (-2.6 kcal/mol) (ຮູບເສີມ S8). ອິນໂດລທີ່ມີຮາໂລເຈນສ່ວນໃຫຍ່ ແລະ ອິນໂດລຕົວມັນເອງ, ຍົກເວັ້ນ 5-iodoindole ແລະ 2-iodoindole, ສ້າງພັນທະກັບ serine 260. ຄວາມຈິງທີ່ວ່າພັນທະໄຮໂດຣເຈນກັບ leucine 218 ເປັນຕົວຊີ້ບອກເຖິງການຜູກມັດຂອງຕົວຮັບ-ລີກັນທີ່ມີປະສິດທິພາບ, ດັ່ງທີ່ສັງເກດເຫັນສຳລັບ ivermectin (ຮູບເສີມ S7), ຢືນຢັນວ່າ 5-iodoindole ແລະ 2-iodoindole, ເຊັ່ນດຽວກັບ ivermectin, ຜູກມັດຢ່າງແໜ້ນໜາກັບບໍລິເວນທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຂອງຕົວຮັບ GluCL ຜ່ານ leucine 218 (ຮູບທີ 6 ແລະ ຮູບເສີມ S8). ພວກເຮົາສະເໜີວ່າການຜູກມັດນີ້ແມ່ນຈຳເປັນເພື່ອຮັກສາໂຄງສ້າງຮູຂຸມຂົນເປີດຂອງສະລັບສັບຊ້ອນ GluCL ແລະ ໂດຍການຜູກມັດຢ່າງແໜ້ນໜາກັບບໍລິເວນທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຂອງຕົວຮັບ GluCL, 5-iodoindole, 2-iodoindole, avermectin ແລະ ivermectin ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຮັກສາຊ່ອງທາງໄອອອນເປີດ ແລະ ອະນຸຍາດໃຫ້ການດູດຊຶມຂອງນ້ຳ.
ການເຊື່ອມຕໍ່ໂມເລກຸນຂອງອິນໂດລ ແລະ ອິນໂດລທີ່ມີຮາໂລເຈນກັບ GluCL. ທິດທາງການຜູກມັດຂອງລີກັນ (A) ອິນໂດລ, (B) 4-ຟລູໂອອິນໂດລ, (C) 7-ໄອໂອໂດອິນໂດລ, ແລະ (D) 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລ ກັບບໍລິເວນທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຂອງ GluCL. ໂປຣຕີນຖືກສະແດງດ້ວຍແຖບ, ແລະພັນທະໄຮໂດຣເຈນກະດູກສັນຫຼັງຖືກສະແດງເປັນເສັ້ນຈຸດສີເຫຼືອງ. (A′), (B′), (C′), ແລະ (D′) ສະແດງໃຫ້ເຫັນປະຕິກິລິຍາຂອງລີກັນທີ່ສອດຄ້ອງກັນກັບສານອາຊິດອະມິໂນອ້ອມຂ້າງ, ແລະພັນທະໄຮໂດຣເຈນຕ່ອງໂສ້ຂ້າງຖືກສະແດງດ້ວຍລູກສອນຈຸດສີບົວ.
ການທົດລອງໄດ້ດຳເນີນເພື່ອປະເມີນຜົນກະທົບທີ່ເປັນພິດຂອງ 5-iodoindole ຕໍ່ການແຕກງອກຂອງເມັດກະລໍ່າປີ ແລະ ຜັກກາດຂາວ. 5-iodoindole (0.05 ຫຼື 0.1 mM) ຫຼື avermectin (10 μg/mL) ມີຜົນກະທົບໜ້ອຍ ຫຼື ບໍ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການແຕກງອກໃນເບື້ອງຕົ້ນ ແລະ ການເກີດຂອງຕົ້ນອ່ອນ (ຮູບທີ 7). ນອກຈາກນັ້ນ, ບໍ່ພົບຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ສຳຄັນລະຫວ່າງອັດຕາການແຕກງອກຂອງເມັດຄວບຄຸມທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ ແລະ ເມັດທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ 5-iodoindole ຫຼື avermectin. ຜົນກະທົບຕໍ່ການຍືດຕົວຂອງຮາກແກ້ວ ແລະ ຈຳນວນຮາກຂ້າງທີ່ສ້າງຂຶ້ນແມ່ນບໍ່ສຳຄັນ, ເຖິງແມ່ນວ່າ 1 mM (10 ເທົ່າຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວ) ຂອງ 5-iodoindole ເຮັດໃຫ້ການພັດທະນາຂອງຮາກຂ້າງຊັກຊ້າເລັກນ້ອຍ. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ຊີ້ບອກວ່າ 5-iodoindole ບໍ່ເປັນພິດຕໍ່ຈຸລັງພືດ ແລະ ບໍ່ແຊກແຊງຂະບວນການພັດທະນາຂອງພືດໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ໄດ້ສຶກສາ.
ຜົນກະທົບຂອງ 5-iodoindole ຕໍ່ການແຕກງອກຂອງແກ່ນ. ການແຕກງອກ, ການແຕກງອກ ແລະ ການຮາກຂ້າງຂອງແກ່ນ B. oleracea ແລະ R. raphanistrum ໃນອາຫານວ່າງ Murashige ແລະ Skoog ທີ່ມີ ຫຼື ບໍ່ມີ avermectin ຫຼື 5-iodoindole. ການແຕກງອກໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ຫຼັງຈາກ 3 ມື້ຂອງການຟັກຢູ່ທີ່ອຸນຫະພູມ 22°C.
ການສຶກສານີ້ລາຍງານຫຼາຍກໍລະນີຂອງການຂ້າເນມາໂທດໂດຍອິນໂດລ. ສິ່ງສຳຄັນ, ນີ້ແມ່ນລາຍງານທຳອິດຂອງ iodoindole ທີ່ກະຕຸ້ນ methylation (ຂະບວນການທີ່ເກີດຈາກການສະສົມຂອງ vacuoles ຂະໜາດນ້ອຍທີ່ຄ່ອຍໆລວມເຂົ້າກັນເປັນ vacuoles ຂະໜາດໃຫຍ່, ໃນທີ່ສຸດນຳໄປສູ່ການແຕກຂອງເຍື່ອຫຸ້ມແລະການຕາຍ) ໃນໃບສົນ, ໂດຍ iodoindole ສະແດງຄຸນສົມບັດການຂ້າເນມາໂທດທີ່ສຳຄັນຄ້າຍຄືກັບຢາຂ້າເນມາໂທດ avermectin ທາງການຄ້າ.
ໄດ້ມີການລາຍງານວ່າອິນໂດລສ໌ມີໜ້າທີ່ສົ່ງສັນຍານຫຼາຍຢ່າງໃນໂປຣແຄຣິໂອດ ແລະ ຢູແຄຣິໂອດ, ລວມທັງການຍັບຍັ້ງ/ການສ້າງຟິມຊີວະພາບ, ການຢູ່ລອດຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣຍ, ແລະ ຄວາມສາມາດໃນການເກີດພະຍາດ19,32,33,34. ເມື່ອບໍ່ດົນມານີ້, ຜົນກະທົບດ້ານການປິ່ນປົວທີ່ມີທ່າແຮງຂອງອິນໂດລສ໌ທີ່ມີຮາໂລເຈນ, ອັລຄາລອຍອິນໂດລ, ແລະ ອະນຸພັນອິນໂດລເຄິ່ງສັງເຄາະໄດ້ດຶງດູດຄວາມສົນໃຈໃນການຄົ້ນຄວ້າຢ່າງກວ້າງຂວາງ35,36,37. ຕົວຢ່າງ, ອິນໂດລສ໌ທີ່ມີຮາໂລເຈນໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າສາມາດຂ້າຈຸລັງ Escherichia coli ແລະ Staphylococcus aureus ທີ່ຍັງຄົງຄ້າງ37. ນອກຈາກນັ້ນ, ມັນຍັງມີຄວາມສົນໃຈທາງວິທະຍາສາດທີ່ຈະສຶກສາປະສິດທິພາບຂອງອິນໂດລສ໌ທີ່ມີຮາໂລເຈນຕໍ່ກັບຊະນິດ, ສະກຸນ, ແລະ ອານາຈັກອື່ນໆ, ແລະ ການສຶກສານີ້ແມ່ນບາດກ້າວໄປສູ່ການບັນລຸເປົ້າໝາຍນີ້.
ໃນທີ່ນີ້, ພວກເຮົາສະເໜີກົນໄກສຳລັບການຕາຍທີ່ເກີດຈາກ 5-iodoindole ໃນ C. elegans ໂດຍອີງໃສ່ການບາດເຈັບຂອງຈຸລັງທີ່ສາມາດປີ້ນກັບຄືນໄດ້ (RCI) ແລະ methylation (ຮູບທີ 4C ແລະ 5). ການປ່ຽນແປງທີ່ເປັນອາການໃຄ່ບວມເຊັ່ນ: ອາການໃຄ່ບວມ ແລະ ການເສື່ອມສະພາບຂອງ vacuolar ແມ່ນຕົວຊີ້ບອກຂອງ RCI ແລະ methylation, ເຊິ່ງສະແດງອອກເປັນ vacuoles ຂະໜາດໃຫຍ່ໃນ cytoplasm48,49. RCI ແຊກແຊງການຜະລິດພະລັງງານໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນການຜະລິດ ATP, ເຮັດໃຫ້ປັ໊ມ ATPase ລົ້ມເຫຼວ, ຫຼື ລົບກວນເຍື່ອຫຸ້ມເຊລ ແລະ ເຮັດໃຫ້ເກີດການໄຫຼເຂົ້າຢ່າງໄວວາຂອງ Na+, Ca2+, ແລະ ນໍ້າ50,51,52. vacuoles ໃນ cytoplasm ເກີດຂຶ້ນໃນຈຸລັງສັດເປັນຜົນມາຈາກການສະສົມຂອງນໍ້າໃນ cytoplasm ເນື່ອງຈາກການໄຫຼເຂົ້າຂອງ Ca2+ ແລະ ນໍ້າ53. ສິ່ງທີ່ໜ້າສົນໃຈແມ່ນກົນໄກການທຳລາຍຂອງເຊວນີ້ສາມາດປີ້ນກັບຄືນໄດ້ຖ້າຄວາມເສຍຫາຍເປັນພຽງຊົ່ວຄາວ ແລະ ເຊວເລີ່ມຜະລິດ ATP ເປັນໄລຍະເວລາໜຶ່ງ, ແຕ່ຖ້າຄວາມເສຍຫາຍຍັງຄົງຢູ່ ຫຼື ຮ້າຍແຮງຂຶ້ນ, ເຊວຈະຕາຍ.54 ການສັງເກດການຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າເນມາໂຕດທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ 5-iodoindole ບໍ່ສາມາດຟື້ນຟູການສັງເຄາະທາງຊີວະພາບຕາມປົກກະຕິໄດ້ຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບສານຄວາມຕຶງຄຽດ.
ຮູບແບບການເມທິເລຊັນທີ່ເກີດຈາກ 5-iodoindole ໃນ B. xylophilus ອາດຈະເປັນຍ້ອນການມີທາດໄອໂອດິນ ແລະ ການແຈກຢາຍໂມເລກຸນຂອງມັນ, ເນື່ອງຈາກ 7-iodoindole ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການຍັບຍັ້ງ B. xylophilus ໜ້ອຍກວ່າ 5-iodoindole (ຕາຕະລາງທີ 1 ແລະ ຮູບເສີມ S6). ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ສອດຄ່ອງກັບການສຶກສາຂອງ Maltese et al. (2014), ຜູ້ທີ່ລາຍງານວ່າການຍົກຍ້າຍຂອງ pyridyl nitrogen moiety ໃນ indole ຈາກ para- ໄປຫາ meta-position ໄດ້ລົບລ້າງ vacuolization, ການຍັບຍັ້ງການເຕີບໂຕ, ແລະ cytotoxicity ໃນຈຸລັງ U251, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການພົວພັນຂອງໂມເລກຸນກັບສະຖານທີ່ເຄື່ອນໄຫວສະເພາະໃນໂປຣຕີນແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນຫຼາຍ27,44,45. ການພົວພັນລະຫວ່າງ indoles indole ຫຼື halogenated indoles ແລະ ຕົວຮັບ GluCL ທີ່ສັງເກດເຫັນໃນການສຶກສານີ້ຍັງສະໜັບສະໜູນແນວຄວາມຄິດນີ້, ຍ້ອນວ່າ 5- ແລະ 2-iodoindole ຖືກພົບວ່າຜູກມັດກັບຕົວຮັບ GluCL ຢ່າງແຂງແຮງກ່ວາ indoles ອື່ນໆທີ່ຖືກກວດສອບ (ຮູບທີ 6 ແລະ ຮູບເສີມ S8). ທາດໄອໂອດິນຢູ່ຕຳແໜ່ງທີສອງ ຫຼື ທີຫ້າຂອງອິນໂດລຖືກພົບວ່າຜູກມັດກັບລີວຊີນ 218 ຂອງຕົວຮັບ GluCL ຜ່ານພັນທະໄຮໂດຣເຈນກະດູກສັນຫຼັງ, ໃນຂະນະທີ່ອິນໂດລທີ່ມີຮາໂລເຈນອື່ນໆ ແລະ ອິນໂດລເອງສ້າງພັນທະໄຮໂດຣເຈນຕ່ອງໂສ້ຂ້າງທີ່ອ່ອນແອກັບຊີຣີນ 260 (ຮູບທີ 6). ດັ່ງນັ້ນ, ພວກເຮົາຄາດຄະເນວ່າການຕັ້ງຖິ່ນຖານຂອງຮາໂລເຈນມີບົດບາດສຳຄັນໃນການກະຕຸ້ນການເສື່ອມສະພາບຂອງແວຄູໂອລາ, ໃນຂະນະທີ່ການຜູກມັດທີ່ແໜ້ນໜາຂອງ 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລຮັກສາຊ່ອງທາງໄອອອນເປີດ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງເຮັດໃຫ້ນ້ຳໄຫຼເຂົ້າຢ່າງໄວວາ ແລະ ການແຕກຂອງແວຄິວໂອລ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ກົນໄກການອອກລິດລະອຽດຂອງ 5-ໄອໂອໂດອິນໂດລຍັງຕ້ອງໄດ້ກຳນົດ.
ກ່ອນການນຳໃຊ້ 5-iodoindole ໃນທາງປະຕິບັດ, ຄວນວິເຄາະຜົນກະທົບທີ່ເປັນພິດຂອງມັນຕໍ່ພືດ. ການທົດລອງການແຕກງອກຂອງແກ່ນພັນຂອງພວກເຮົາສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ 5-iodoindole ບໍ່ມີຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ການແຕກງອກຂອງແກ່ນພັນ ຫຼື ຂະບວນການພັດທະນາຕໍ່ມາໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ໄດ້ສຶກສາ (ຮູບທີ 7). ດັ່ງນັ້ນ, ການສຶກສານີ້ຈຶ່ງສະໜອງພື້ນຖານສຳລັບການນຳໃຊ້ 5-iodoindole ໃນສະພາບແວດລ້ອມທາງນິເວດວິທະຍາເພື່ອຄວບຄຸມຄວາມເປັນອັນຕະລາຍຂອງໄສ້ເດືອນສົນຕໍ່ຕົ້ນສົນ.
ບົດລາຍງານກ່ອນໜ້ານີ້ໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວດ້ວຍຢາອິນໂດລເປັນວິທີການທີ່ມີທ່າແຮງໃນການແກ້ໄຂບັນຫາການດື້ຢາຕ້ານເຊື້ອ ແລະ ການແຜ່ລະບາດຂອງມະເຮັງ55. ນອກຈາກນັ້ນ, ຢາອິນໂດລຍັງມີກິດຈະກຳຕ້ານເຊື້ອແບັກທີເຣຍ, ຕ້ານມະເຮັງ, ຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະ, ຕ້ານການອັກເສບ, ຕ້ານພະຍາດເບົາຫວານ, ຕ້ານໄວຣັດ, ຕ້ານການແຜ່ລະບາດ ແລະ ຕ້ານວັນນະໂລກ ແລະ ອາດຈະເປັນພື້ນຖານທີ່ມີຄວາມຫວັງສຳລັບການພັດທະນາຢາ56,57. ການສຶກສານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເປັນຄັ້ງທຳອິດກ່ຽວກັບການນຳໃຊ້ທາດໄອໂອດິນທີ່ມີທ່າແຮງເປັນຕົວແທນຕ້ານແມ່ກາຝາກ ແລະ ຢາຂ້າແມ່ທ້ອງ.
ຢາ Avermectin ໄດ້ຖືກຄົ້ນພົບເມື່ອສາມທົດສະວັດກ່ອນ ແລະ ໄດ້ຮັບລາງວັນໂນແບລໃນປີ 2015, ແລະ ການນຳໃຊ້ເປັນຢາຂ້າແມ່ທ້ອງຍັງຄົງດຳເນີນຢູ່. ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ເນື່ອງຈາກການພັດທະນາຢ່າງໄວວາຂອງຄວາມຕ້ານທານຕໍ່ຢາ avermectins ໃນໄສ້ເດືອນ ແລະ ສັດຕູພືດ, ຈຶ່ງຈຳເປັນຕ້ອງມີຍຸດທະສາດທາງເລືອກອື່ນ, ລາຄາຖືກ, ແລະ ເປັນມິດກັບສິ່ງແວດລ້ອມເພື່ອຄວບຄຸມການຕິດເຊື້ອ PWN ໃນຕົ້ນສົນ. ການສຶກສານີ້ຍັງລາຍງານກົນໄກທີ່ 5-iodoindole ຂ້າໄສ້ເດືອນສົນ ແລະ 5-iodoindole ມີຄວາມເປັນພິດຕ່ຳຕໍ່ຈຸລັງພືດ, ເຊິ່ງເປີດໂອກາດທີ່ດີສຳລັບການນຳໃຊ້ທາງການຄ້າໃນອະນາຄົດ.
ການທົດລອງທັງໝົດໄດ້ຮັບການອະນຸມັດຈາກຄະນະກຳມະການຈັນຍາບັນຂອງມະຫາວິທະຍາໄລ Yeungnam, Gyeongsan, ເກົາຫຼີ, ແລະວິທີການຕ່າງໆໄດ້ຖືກປະຕິບັດຕາມແນວທາງຂອງຄະນະກຳມະການຈັນຍາບັນຂອງມະຫາວິທະຍາໄລ Yeungnam.
ການທົດລອງການຟັກໄຂ່ໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ຂັ້ນຕອນທີ່ໄດ້ກຳນົດໄວ້43. ເພື່ອປະເມີນອັດຕາການຟັກ (HR), ໄສ້ເດືອນໂຕຜູ້ໃຫຍ່ອາຍຸ 1 ມື້ (ປະມານ 100 ໂຕເພດຍິງ ແລະ 100 ໂຕເພດຜູ້) ໄດ້ຖືກໂອນໄປຫາຖ້ວຍ Petri ທີ່ມີເຊື້ອເຫັດ ແລະ ປ່ອຍໃຫ້ມັນເຕີບໃຫຍ່ເປັນເວລາ 24 ຊົ່ວໂມງ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ໄຂ່ໄດ້ຖືກແຍກອອກ ແລະ ປະຕິບັດດ້ວຍ 5-iodoindole (0.05 mM ແລະ 0.1 mM) ຫຼື avermectin (10 μg/ml) ເປັນນ້ຳຢາລະລາຍໃນນ້ຳກັ່ນທີ່ເປັນໝັນ. ນ້ຳຢາລະລາຍເຫຼົ່ານີ້ (500 μl; ປະມານ 100 ໄຂ່) ໄດ້ຖືກໂອນໄປຫາບໍ່ຂອງແຜ່ນວັດທະນະທຳເນື້ອເຍື່ອ 24 ບໍ່ ແລະ ຟັກຢູ່ທີ່ 22 °C. ການນັບ L2 ໄດ້ຖືກເຮັດຫຼັງຈາກການຟັກ 24 ຊົ່ວໂມງ ແຕ່ຖືກຖືວ່າຕາຍແລ້ວ ຖ້າຈຸລັງບໍ່ເຄື່ອນຍ້າຍເມື່ອຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍສາຍ platinum ລະອຽດ. ການທົດລອງນີ້ໄດ້ດຳເນີນໃນສອງໄລຍະ, ແຕ່ລະໄລຍະມີຫົກຄັ້ງຊ້ຳກັນ. ຂໍ້ມູນຈາກການທົດລອງທັງສອງໄດ້ຖືກລວມເຂົ້າກັນ ແລະ ນຳສະເໜີ. ເປີເຊັນຂອງ HR ຖືກຄິດໄລ່ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
ການຕາຍຂອງຕົວອ່ອນໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ຂັ້ນຕອນທີ່ພັດທະນາຂຶ້ນກ່ອນໜ້ານີ້. ໄຂ່ຂອງຕົວອ່ອນໄດ້ຖືກເກັບກຳ ແລະ ຕົວອ່ອນໄດ້ຖືກປັບໃຫ້ກົງກັນໂດຍການຟັກໃນນ້ຳກັ່ນທີ່ປອດເຊື້ອເພື່ອສ້າງຕົວອ່ອນໄລຍະ L2. ຕົວອ່ອນທີ່ປັບໃຫ້ກົງກັນ (ປະມານ 500 ໂຕ) ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ 5-iodoindole (0.05 mM ແລະ 0.1 mM) ຫຼື avermectin (10 μg/ml) ແລະ ລ້ຽງໃນແຜ່ນ Petri ຂອງ B. cinerea. ຫຼັງຈາກຟັກເປັນເວລາ 48 ຊົ່ວໂມງທີ່ອຸນຫະພູມ 22 °C, ຕົວອ່ອນໄດ້ຖືກເກັບກຳໃນນ້ຳກັ່ນທີ່ປອດເຊື້ອ ແລະ ກວດສອບວ່າມີໄລຍະ L2, L3, ແລະ L4 ຫຼືບໍ່. ການມີໄລຍະ L3 ແລະ L4 ຊີ້ບອກເຖິງການຫັນປ່ຽນຂອງຕົວອ່ອນ, ໃນຂະນະທີ່ການມີໄລຍະ L2 ຊີ້ບອກເຖິງການຫັນປ່ຽນ. ຮູບພາບໄດ້ຖືກເກັບມາໂດຍໃຊ້ລະບົບການຖ່າຍພາບຈຸລັງດິຈິຕອນ iRiS™. ການທົດລອງນີ້ໄດ້ດຳເນີນໃນສອງໄລຍະ, ແຕ່ລະໄລຍະມີຫົກຄັ້ງ. ຂໍ້ມູນຈາກການທົດລອງທັງສອງໄດ້ຖືກລວມເຂົ້າກັນ ແລະ ນຳສະເໜີ.
ຄວາມເປັນພິດຂອງ 5-iodoindole ແລະ avermectin ຕໍ່ແກ່ນໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ການທົດສອບການແຕກງອກໃນແຜ່ນວຸ້ນ Murashige ແລະ Skoog.62 ແກ່ນ B. oleracea ແລະ R. raphanistrum ໄດ້ຖືກແຊ່ນ້ຳກັ່ນທີ່ປອດເຊື້ອເປັນເວລາໜຶ່ງມື້, ລ້າງດ້ວຍເອທານອນ 100% 1 ມລ, ຂ້າເຊື້ອດ້ວຍນ້ຳຢາຟອກຂາວ 50% ທາງການຄ້າ (3% sodium hypochlorite) 1 ມລ ເປັນເວລາ 15 ນາທີ, ແລະ ລ້າງຫ້າເທື່ອດ້ວຍນ້ຳຂ້າເຊື້ອ 1 ມລ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ແກ່ນທີ່ຂ້າເຊື້ອແລ້ວໄດ້ຖືກກົດໃສ່ແຜ່ນວຸ້ນການແຕກງອກທີ່ມີສານອາຫານ Murashige ແລະ Skoog 0.86 g/l (0.2X) ແລະ ວຸ້ນເຊື້ອແບັກທີເຣຍ 0.7% ທີ່ມີ ຫຼື ບໍ່ມີ 5-iodoindole ຫຼື avermectin. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ແຜ່ນວຸ້ນໄດ້ຖືກບົ່ມຢູ່ທີ່ 22°C, ແລະ ຮູບພາບໄດ້ຖືກຖ່າຍຫຼັງຈາກການບົ່ມເປັນເວລາ 3 ມື້. ການທົດລອງນີ້ໄດ້ດຳເນີນໃນສອງໄລຍະ, ແຕ່ລະໄລຍະມີຫົກຄັ້ງ.